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超微量分光光度計的原理

超微量分光光度計是一種基于分光光度法的儀器,用于測量樣品對特定波長光的吸收(吸光度)。其核心原理是利用光源(如氙燈或LED)發射光束,通過樣品后,由檢測器捕獲透射光強度,計算吸光度值(A)。根據比爾-朗伯定律(Beer-Lambert Law),吸光度與樣品濃度成正比,公式為 A = εlc,其中ε是摩爾吸光系數,l是光程長度,c是濃度。超微量版本的關鍵創新在于光程設計:例如,1mm光程(如產品中的1mm模式)允許使用極少量樣品(通常0.5-2μl),通過減少光路長度來適應低濃度檢測,避免稀釋需求。
這類儀器通常支持全波長范圍(如200-800nm),覆蓋核酸(DNA/RNA在260nm)和蛋白質(280nm)的特征吸收峰。雙檢測模式是另一個重要技術:基座上樣用于超微量樣品(直接滴加在檢測表面),而比色皿模式適用于常規體積樣品(如1ml),這擴展了適用濃度范圍(如ds DNA從2ng/μl到15000ng/μl)。操作中,多點觸控界面簡化了設置和數據讀取,提高了再現性(即重復測量的穩定性)。